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 分類: 轉(zhuǎn)錄組測序

也許是不甘心永遠當調(diào)味品,洋蔥為了引起關(guān)注,切開的洋蔥會刺激眼睛,讓我們不由自主的流眼淚。這是因為,洋蔥細胞中含有酶,當細胞被割裂時,酶會跑出來,然后它會分解從割裂細胞中逃逸出來的氨酸亞砜,形成次磺酸,磺酸快速重組,揮發(fā)氣體,氣體到達我們的眼睛里,與保持眼睛濕潤的水分發(fā)生反應(yīng),所以我們會流眼淚。

有沒有什么辦法,降低洋蔥辛辣的刺激性,提高洋蔥的甘甜的口感呢?

2016年9月,百邁客與北京農(nóng)林科學(xué)院蔬菜所的一項研究為解決這個問題提供了理論基礎(chǔ)。前人已有的研究表明,淀粉或蔗糖代謝在球莖的形成和發(fā)育過程中發(fā)揮著重要作用。為了分析洋蔥在球莖膨大過程中蔗糖的代謝和甜味的發(fā)展情況,我們利用RNA-seq對三個不同發(fā)育階段的洋蔥球莖進行轉(zhuǎn)錄組測序。

英文名稱:Transcriptome Analysis of Sucrose Metabolism during Bulb Swelling and Development in Onion (Allium cepa L.)
雜志:frontiers in plant science
影響因子:4.495

實驗材料

洋蔥球莖,每組樣本3個生物學(xué)重復(fù)。

DAS:day after swelling。

 

實驗思路

 

文章結(jié)果

經(jīng)過測序分析,我們最終鑒定了參與洋蔥球莖形成和發(fā)育的差異表達基因,篩選出與蔗糖、葡萄糖和果糖代謝相關(guān)的關(guān)鍵基因。

1.質(zhì)量評估和數(shù)據(jù)過濾后共獲得72.53M clean reads。Q30在85%以上。說明測序數(shù)據(jù)的準確性和數(shù)據(jù)量滿足后續(xù)分析。用trinity將reads組裝到79376條Unigenes,平均長度為678bp。ContigN50為1093bp。

2.用BLASTX將組裝得到的序列與Nr,Swiss-Prot,GO,COG和KEGG數(shù)據(jù)庫進行比對,共有8288個Unigenes注釋到了25個COG類別中的11713個功能。有585個Unigenes注釋到“碳水化合物的運輸和代謝”。

 

3.為了鑒定在洋蔥球莖膨脹過程中活躍的通路,將得到的unigenes與KEGG數(shù)據(jù)庫中標準參考通路進行比對。15 DAS vs. 30 DAS注釋到了95個pathway,15 DAS vs. 40 DAS 注釋到了79個pathway,30 DAS vs. 40 DAS注釋到了86個pathway。共有6113個unigenes注釋到了120條KEGG通路中。“淀粉和蔗糖代謝”構(gòu)成了各樣本文庫中的初級代謝途徑,并有可能在球莖膨大和發(fā)育過程中活性更高。

4.設(shè)置P < 0.01和|log2 (fold change)|≥1,篩選出在球莖發(fā)育過程中的差異表達基因。在3個不同發(fā)育階段共獲得5416個差異表達基因。為深入了解洋蔥發(fā)育過程中蔗糖代謝,結(jié)合文獻中的已有的報道并根據(jù)洋蔥RNA測序數(shù)據(jù)注釋中的關(guān)鍵詞搜索共列篩選出147個差異調(diào)控淀粉和蔗糖代謝的關(guān)鍵基因。根據(jù)洋蔥球莖發(fā)育過程中蔗糖、葡萄糖、果糖水平的變化,挑選出6個差異表達基因可能在洋蔥球莖發(fā)育早期發(fā)揮重要作用,分別為CWIN,SUT,SuSy (SuSy1,SuSy2)和INV (INV1,INV2)。

 

 

 

5.使用qRT-PCR驗證參與蔗糖代謝的差異表達基因。這6個差異表達基因的表達水平與RNA-seq結(jié)果是一致的。

 

結(jié)論

本研究結(jié)果表明,程序化的基因表達以及不同發(fā)育階段中葡萄糖、果糖和蔗糖的含量變化對球莖膨大十分重要。這些發(fā)現(xiàn)對于我們理解洋蔥球莖發(fā)育的分子機制具有重要作用。相信在不遠的將來,這些理論基礎(chǔ)就會運用到實際當中,提高洋蔥的糖分,降低氣味刺激性,到那時,媽媽再也不用擔(dān)心切洋蔥時會辣眼睛了。

參考文獻

Zhang C, Zhang H, Zhan Z, et al. Transcriptome Analysis of Sucrose Metabolism during Bulb Swelling and Development in Onion (Allium cepa L.)[J]. Frontiers in Plant Science, 2016, 7.

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