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真菌基因組精細(xì)圖（PacBio）

全面分析 深度研究

真菌基因組產(chǎn)品技術(shù)介紹

真菌基因組研究，?采用2+3或2+3+HiC等測序策略對真菌基因組進(jìn)行測序、組裝以及功能注釋，可根據(jù)不同需求選擇真菌基因組調(diào)研圖、真菌基因組精細(xì)圖以及真菌基因組準(zhǔn)完成圖進(jìn)行研究

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根據(jù)不同研究提供全面技術(shù)分析

真菌基因組相對復(fù)雜，百邁客可根據(jù)具體的研究目的提供不同的研究方案，采用二代測序、三代測序以及HiC等豐富全面的測序平臺(tái)對真菌基因組進(jìn)行深度研究。

測序策略和送樣要求

產(chǎn)品類型 測序策略 承諾指標(biāo) 總量要求（μg）
調(diào)研圖 Illumina 承諾測序深度 ≥0.6
精細(xì)圖 Illumina?50X?+?ONT?100X Contig?N50?≥2M ≥3
Pacbio?HIFI?30X
準(zhǔn)完成圖 Illumina?50X?+?ONT?100X?(Pacbio?HIFI?30X)?+?Hi-C?100X 至少90%的基因組序列定位到染色體 ≥5

環(huán)境樣品 取樣方法 保存及運(yùn)輸
單細(xì)胞真菌 顯微鏡下觀察酵母菌生長狀態(tài)，盡量收集生長期處于對數(shù)期的酵母菌；將適量體積的酵母菌液轉(zhuǎn)移至將2?mL旋蓋尖底離心管中（無菌，無核酸酶），于室溫下14000×g?離心1?min；棄盡培養(yǎng)基，將酵母細(xì)胞沉淀迅速置于液氮中冷凍3?h以上，然后轉(zhuǎn)移至-80?°C長期保存 -80℃冰箱保存，干冰運(yùn)輸
大型真菌 從菌體上，取下生長旺盛的組織，用無菌水沖洗干凈，再使用?75%乙醇沖洗，用吸水紙吸干樣品表面；如果組織體積較大，應(yīng)盡量將組織剪切成長寬高均≤0.5cm?的小塊；將處理好的組織樣本保存于2?ml?或更大體積的旋蓋凍存管中或者用準(zhǔn)備好的錫箔紙包裹組織

全面豐富的信息分析內(nèi)容

提供專業(yè)的真菌基因組分析，√確豐度的標(biāo)準(zhǔn)分析對真菌詳細(xì)信息進(jìn)行解讀，全面了解基因組信息，通過比較基因組分析，可更深度解讀真菌生物學(xué)意義。

分析類型 研究目的 具體分析內(nèi)容
分析內(nèi)容 基因組組裝 測序數(shù)據(jù)質(zhì)控；基因組組裝：組裝結(jié)果統(tǒng)計(jì)，組裝評估
基因組組裝分析 重復(fù)序列預(yù)測；編碼基因預(yù)測；非編碼RNA預(yù)測；假基因預(yù)測；基因簇預(yù)測
基因組功能注釋 通用數(shù)據(jù)庫注釋：GO,?KEGG,?KOG,?TrEMBL，Swiss-prot,?Nr,?pfam；
專有數(shù)據(jù)庫注釋：?CAZy，TCDB，PHI，CYPED，DFVF；
蛋白亞細(xì)胞定位分析：信號(hào)肽預(yù)測；跨膜蛋白預(yù)測；分泌蛋白預(yù)測；效應(yīng)蛋白預(yù)測
表觀遺傳 6mA，4mC甲基化修飾位點(diǎn)分析；特異性motif分析
高級分析（可選） 比較基因組等 特有功能基因富集分析；快速進(jìn)化基因檢測；快速進(jìn)化基因功能分析；物種間進(jìn)化關(guān)系分析；共線性分析；

真菌基因組測序我們更專業(yè)

真菌基因組測序，依托豐富全面的二代測序、三代測序、HiC等先進(jìn)平臺(tái)，百邁客對于真菌基因組研究更為專業(yè)。

多角度研究技術(shù)

全面的信息分析

豐富的項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)

提供整體解決方案

技術(shù)路線

對真菌基因組進(jìn)行提取，根據(jù)研究目的進(jìn)行不同產(chǎn)品選擇，對應(yīng)相應(yīng)建庫測序策略組裝真菌基因組進(jìn)行分析。

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KOG分析

真菌基因預(yù)測基因比對到KOG數(shù)據(jù)庫，可對真菌基因產(chǎn)物進(jìn)行直系同源分類。

共有特有基因分析

通過比較基因組分析，借助OrthoMCL軟件對蛋白序列進(jìn)行家族分類，尋找真菌特有的基因家族。

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信號(hào)肽預(yù)測

號(hào)肽是引導(dǎo)新合成的蛋白質(zhì)向分泌通路轉(zhuǎn)移的短肽鏈，可以引導(dǎo)蛋白跨膜轉(zhuǎn)移。利用已預(yù)測得到的蛋白質(zhì)序列，預(yù)測氨基酸序列中是否存在信號(hào)肽

共線性分析

利用真菌的基因序列與近源物種的基因序列進(jìn)行Blastn比對，尋找兩個(gè)物種間同源的基因、蛋白序列，然后根據(jù)同源基因在各個(gè)真菌中序列上的位置信息得到核酸水平上的共線性關(guān)系

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1、真菌基因組二代+三代具體是怎么組裝的？

答：具體的組裝方法有三種，選擇組裝結(jié)果。

方法一：二代數(shù)據(jù)和三代數(shù)據(jù)測序片段混合組裝；

方法二：二代數(shù)據(jù)和三代數(shù)據(jù)分別組裝，然后再用分別組裝后的結(jié)果在congtig水平再連接組裝；

方法三：二代數(shù)據(jù)組裝，再用三代數(shù)據(jù)對二代組裝的contig進(jìn)行連接到scaffold水平。

2、真菌基因組準(zhǔn)完成圖是什么意思？

答：真菌基因組準(zhǔn)完成圖是通過二代測序+三代測序+光學(xué)圖譜結(jié)合進(jìn)行組裝分析，將真菌基因組組裝到近染色體的水平，組裝到近染色體不是說通過光學(xué)把組裝的scaffold掛到染色體上，意思是組裝出來的scaffold數(shù)量接近染色體的數(shù)量，是組裝完整性的一種指標(biāo)。

3、真菌基因組材料選擇有哪些注意事項(xiàng)？

答：對于真菌基因組測序，首先注意保證不要有雜菌的污染，需要通過核染色確定真菌基因組是單核還是多核，可通過細(xì)菌基因組調(diào)研圖來確定雜合度以及重復(fù)序列，再評估最佳的精細(xì)圖測序策略。