英文名稱(chēng):Saltwater intrusion affecting NO2? accumulation in demersal fishery species by bacterially mediated N-cycling
中文名稱(chēng):鹽水入侵通過(guò)細(xì)菌介導(dǎo)的N-循環(huán)影響底棲魚(yú)種中NO2-的積累
雜志:Science of The Total Environment
影響因子:10.753
合作單位:中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院
研究背景
鹽水入侵(SWI)對(duì)淡水/河口河流生態(tài)系統(tǒng)有顯著影響,初步影響是干擾營(yíng)養(yǎng)物的生物地球化學(xué)轉(zhuǎn)化。例如,海水驅(qū)動(dòng)的水文效應(yīng)會(huì)降低亞熱帶沿海生態(tài)系統(tǒng)中土壤微生物生物量和土壤酶的活性,并降低二氧化碳凈吸收的能力。此外,海水入侵增加可以減少河口潮汐濕地的氧化亞氮(N2O)排放,并對(duì)亞熱帶海洋水生生態(tài)系統(tǒng)產(chǎn)生負(fù)反饋。因此,SWI無(wú)疑改變了海豚和沿海棲息地的營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)和必需營(yíng)養(yǎng)素的可用性。由于上述營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(如C、N)在SWI作用下發(fā)生改變,河口生態(tài)系統(tǒng)中微生物群落的組成和功能也會(huì)發(fā)生改變,因此,SWI對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)生物地球化學(xué)轉(zhuǎn)化的影響可能與微生物群落沿鹽度梯度的變化有關(guān)。
研究方法
微生物三代全長(zhǎng),宏基因組學(xué)測(cè)序,理化指標(biāo)檢測(cè)
研究結(jié)果
在SWI條件下,環(huán)境參數(shù)的差異
- 從M1到M5的采樣點(diǎn)鹽度升高,每對(duì)采樣點(diǎn)之間有顯著差異(P < 0.05);
- 與鹽度相似,隨著采樣點(diǎn)從M1到M5,水中電導(dǎo)率、TDS和NH4+濃度升高,而TN、NO3?、NO2?和TP濃度降低;
- M1到M5相同樣點(diǎn)沉積物中水分、電導(dǎo)率和NH4+濃度上調(diào),NO3?和NO2?濃度下調(diào),M1與M5間差異顯著(P < 0.05),同時(shí),M5處沉積物TOC濃度也略高于M1處(P < 0.05)
基于16S測(cè)序的SWI條件下細(xì)菌群落組成的差異
- NMDS分析顯示,沉積物中細(xì)菌群落的分類(lèi)和功能組成比水中更加離散,特別是沉積物中的分類(lèi)組成在M1和M5之間表現(xiàn)出明顯的差異;
- 水中的優(yōu)勢(shì)細(xì)菌類(lèi)群是Gammaproteobacteria、Alphaproteobacteria和Bacteroidia,而沉積物中的優(yōu)勢(shì)細(xì)菌類(lèi)群是Campylobacteria,γ變形菌和德?tīng)査冃尉?/li>
- 主要微生物類(lèi)群彎曲菌和Gammaproteobacteria在M1和M5間差異顯著(經(jīng)FDR調(diào)整P < 0.05),表明沉積物中這兩個(gè)類(lèi)群可能存在差異以應(yīng)對(duì)SWI;
- α多樣性表明,水中只有Chao1指數(shù)在M1和M5之間存在顯著差異(P < 0.05)。而沉積物中檢測(cè)到的所有α多樣性指數(shù)(Shannon,Chao1, Simpson)在M1和M5之間差異顯著(P <0.05)。這表明SWI對(duì)腸道細(xì)菌群落的影響大于對(duì)水的影響
基于宏基因組測(cè)序的SWI條件下沉積細(xì)菌群落的差異
- 由于SWI對(duì)沉積細(xì)菌群落有主要影響,對(duì)M1(低鹽度)和M5(高鹽度)進(jìn)行了宏基因組測(cè)序。通過(guò)NMDS分析,沉積物細(xì)菌群落的病灶組成清晰分離;
- 除低豐度細(xì)菌類(lèi)群和未分類(lèi)類(lèi)群外,OTUs在低鹽度下富集的細(xì)菌門(mén),包括放線菌門(mén)、氯化菌門(mén)、脫硫菌門(mén)、厚壁菌門(mén)和變形菌門(mén),而高鹽度的群落包括彎曲菌和普朗菌;
- 沉積性細(xì)菌群落中最豐富的15個(gè)細(xì)菌OTUs來(lái)自10個(gè)類(lèi)別,其中彎曲桿菌和伽馬變形菌門(mén)是最重要的類(lèi)群,各有3種。與此同時(shí),有11個(gè)物種在高鹽度中富集,包括硫脲、硫單胞菌、彎曲桿菌、硫堿桿菌、熱厭氧菌等;
SWI條件下環(huán)境參數(shù)與沉積細(xì)菌群落的相關(guān)性
- db-RDA與Anova檢驗(yàn)顯示,鹽度控制了水中細(xì)菌群落的分類(lèi)和功能組成的變化,而沉積物中群落組成的差異與pH、電導(dǎo)率、NO3?、NO2?和NH4+密切相關(guān),表明細(xì)菌群落對(duì)SWI條件下沉積氮形態(tài)有顯著影響(P < 0.05);
- 使用Mantel檢驗(yàn)計(jì)算群落組成和環(huán)境參數(shù)的Bray-Curtis差異,發(fā)現(xiàn)沉積細(xì)菌群落的電導(dǎo)率和NH4+與分類(lèi)組成顯著相關(guān)(Mantel’s r = 0.962和974,P < 0.05)。同時(shí),電導(dǎo)率和NH4+也與沉積細(xì)菌群落的功能組成密切相關(guān)(Mantel’s r = 0.962和0.985,P <0.05)。因此,SWI條件下沉積物細(xì)菌群落的組成受電導(dǎo)率和NH4+的驅(qū)動(dòng);
- SEM表明,細(xì)菌豐度直接影響NO2?、NO3?和NH4+的濃度,并通過(guò)改變細(xì)菌α多樣性間接影響NO2?和NH4+的濃度;
- 鹽度、電導(dǎo)率和細(xì)菌豐度之間存在正相關(guān)關(guān)系,沉積物中不同的氮形態(tài)有順序的參與;
- Pearson相關(guān)分析顯示,優(yōu)勢(shì)細(xì)菌分類(lèi)群Sulfurovum sp.和sulphimonas sp.與氮形態(tài)(NO2?、NO3?和NH4+)和酶活性(NR和NiR)顯著相關(guān)(P < 0.05);
- 結(jié)果表明SWI可以通過(guò)鹽度改變電導(dǎo)率來(lái)影響細(xì)菌的豐度和多樣性,從而影響沉積物中的氮循環(huán)
SWI條件下細(xì)菌功能基因與氮循環(huán)的相關(guān)性
- 功能基因通過(guò)KEGG途徑富集的結(jié)果表明,氮代謝相關(guān)功能基因在高鹽環(huán)境下的表達(dá)水平高于低鹽環(huán)境,而碳和氨基酸代謝相關(guān)功能基因在低鹽環(huán)境下的表達(dá)水平高于高鹽環(huán)境。這表明SWI通過(guò)建立鹽度梯度刺激氮循環(huán);
- 氮循環(huán)途徑方式與KEGG中“甲烷代謝”、“乙醛酸鹽和二羧酸鹽代謝”、“雙組分系統(tǒng)”等類(lèi)別密切相關(guān),表明氮循環(huán)與上述三種途徑可能是共同響應(yīng)SWI的途徑;
- 通過(guò)MetaBAT2分形分析獲得10個(gè)高質(zhì)量基因組(完整度>90%,污染度<5%),這些基因與氮循環(huán)相關(guān)。例如,Sulfurovum sp.同時(shí)參與了ANRA(基因nasA)和DNRA(基因ark),脫硫菌科自養(yǎng)菌參與ANRA (NR基因)和固氮(nifB基因),脫硫菌科細(xì)菌參與反硝化(基因norA和nosD)和固氮(基因nifU和nifH);
- 由于參與反硝化過(guò)程的細(xì)菌種類(lèi)更多,NiR的酶活性變化(14.5倍)高于NR(2.6倍),表明SWI強(qiáng)烈影響了沉積物中NO2 -的變化。這些結(jié)果表明,SWI促進(jìn)了氮循環(huán)的反硝化過(guò)程,減少了沉積物中NOx-N的滯留,特別是NO2?的滯留