環(huán)狀RNA(circRNA)是一類特殊的非編碼RNA分子,也是RNA領(lǐng)域新的研究熱點(diǎn)。與傳統(tǒng)的線性RNA(linear RNA,含5’和3’末端)不同,circRNA分子呈封閉環(huán)狀結(jié)構(gòu),不受RNA外切酶影響,表達(dá)更穩(wěn)定,不易降解。近幾年的研究表明,circRNA在生物的生長發(fā)育、對(duì)外界環(huán)境的抵御等方面具有重要的調(diào)控作用。CircRNA功能眾多,可作為miRNA的海綿,競爭性結(jié)合miRNA,發(fā)揮ceRNA的調(diào)控功能,調(diào)控基因表達(dá)。近年來還發(fā)現(xiàn)與疾病的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān),在疾病診斷標(biāo)記物等方向具有很大的應(yīng)用前景。
多種標(biāo)準(zhǔn)化和個(gè)性化分析
標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)分析:與參考基因組對(duì)比、circRNA來源基因分析、預(yù)測(cè)circRNA、circRNA表達(dá)水平分析
高級(jí)數(shù)據(jù)分析:circRNA-miRNA互作分析、互作網(wǎng)絡(luò)圖繪制、ceRNA分析、WGCNA分析
CircRNA預(yù)測(cè)
百邁客綜合目前應(yīng)用最廣泛的CircRNA預(yù)測(cè)軟件對(duì)環(huán)狀RNA成環(huán)的剪接位點(diǎn)進(jìn)行預(yù)測(cè),候選CircRNA的剪接位點(diǎn)兩側(cè)存在GU/AG。相同染色體上來源基因起止位點(diǎn)相同即為同一CircRNA。多個(gè)樣品取并集得到的所有CircRNA用于后續(xù)分析。并且將CircAtlas數(shù)據(jù)庫作為ircBase數(shù)據(jù)庫的補(bǔ)充,使常見物種的已知circRNA鑒定的結(jié)果更加完善,更加豐富。
差異CircRNA聚類分析
聚類分析用于判斷差異基因在不同實(shí)驗(yàn)條件下的表達(dá)模式,可通過將表達(dá)模式相同或相近的基因聚集成類,從而識(shí)別未知基因的功能或已知基因的未知功能,同類基因可能具有相似的功能或共同參與同一代謝過程。對(duì)篩選出的差異表達(dá)CircRNA做層次聚類分析,將具有相同或相似表達(dá)行為的CircRNA進(jìn)行聚類。
公司成立多年以來,擁有豐富的項(xiàng)目分析經(jīng)驗(yàn),累計(jì)完成近千個(gè)樣品的circRNA項(xiàng)目研究,物種涉及廣泛,包括人鼠、動(dòng)物、植物常見的組織部為及細(xì)胞樣本??筛鶕?jù)項(xiàng)目需要選擇方案,保障結(jié)果精準(zhǔn)。
答:在CircRNA預(yù)測(cè)時(shí),測(cè)序clean reads需要與參考基因組比對(duì),得到準(zhǔn)確的成環(huán)剪接位點(diǎn)(breakpoint);如果沒有參考基因組或者只有無參轉(zhuǎn)錄組得到的Unigene,可能會(huì)由于拼接錯(cuò)誤等造成CircRNA預(yù)測(cè)不準(zhǔn)確,所以為了得到準(zhǔn)確的分析結(jié)果,需要選擇有參考基因組物種進(jìn)行分析。
答:CircRNA的成環(huán)機(jī)制有:套索驅(qū)動(dòng)的環(huán)化;內(nèi)含子配對(duì)驅(qū)動(dòng)的環(huán)化;內(nèi)含子環(huán)化;RBP或一類反式因子驅(qū)動(dòng)的環(huán)化;可變剪接引起的環(huán)化。
答:circRNA測(cè)序產(chǎn)品可以對(duì)動(dòng)植物、全血、細(xì)胞等組織或者核酸樣本進(jìn)行測(cè)序,分析要求需要有對(duì)應(yīng)物種的參考基因組,具體的送樣指導(dǎo),請(qǐng)參考如下內(nèi)容:
1、作為miRNA分子的海綿 ,circRNA含有大量的miRNA結(jié)合位點(diǎn),具有miRNA海綿作用,進(jìn)而間接調(diào)控miRNA下游靶基因的表達(dá)。
2、circRNA調(diào)控其親本基因的表達(dá),circRNA在轉(zhuǎn)錄后和基因表達(dá)調(diào)控中起著舉足輕重的作用。已有結(jié)果表明,circRNA可以增強(qiáng)其親本基因的轉(zhuǎn)錄。
3、circRNA與RNA結(jié)合蛋白互作,些環(huán)狀RNA上有一個(gè)或者多個(gè)RNA結(jié)合蛋白的結(jié)合位點(diǎn),可作為蛋白分子的海綿體。
4、編碼功能 ,circRNA雖然屬于非編碼RNA,但是也有少數(shù)circRNA可以編碼多肽,通過編碼多肽行使調(diào)控功能。