百創(chuàng)S1000(BMKMANU S1000)是由百邁客生物設計并研發(fā)而來的基于微孔微珠上Spatial Barcode實現(xiàn)對組織切片mRNA分子捕獲的亞細胞級空間轉錄組芯片。百創(chuàng)S1000可以廣泛應用于生物器官發(fā)育、神經(jīng)科學、免疫感染、脅迫應激、生物遺傳進化等生命科學領域的研究。
哺乳動物體細胞平均直徑為10μm,百創(chuàng)S1000空間轉錄芯片分辨率達到了4.8μm,到達亞細胞級別。
百創(chuàng)S1000空間轉錄芯片結果支持從100μm-4.8μm動態(tài)調整。
百創(chuàng)S1000空間轉錄芯片保留原片HE染色,結合高分辨率的spots聚類,能得到更為精準的結果。
百創(chuàng)S1000空間轉錄芯片支持1-8個捕獲區(qū)域的靈活訂制。
Nanopore有效拆分了接近50%。
Nmuber?of?Reads | Number?of?Base | Reads?with?Valid?Barcode | Bases?with?Valid?Barcodes | N50 | Bases?Mapped?to?Transcriptome?And?with?Valid?Barcode |
105,553,898 | 70,516,281,320 | 73.85% | 73.42% | 740 | 49.55% |
二代與三代數(shù)據(jù)的UMI/Gene counts per spot的相關性還是tSEN/UMAP的降維聚類,都顯示具有非常高的一致性。這充分說明百創(chuàng)S1000-Nanopore全長轉錄組產(chǎn)品完全可以獨立進行數(shù)據(jù)的拆分與挖掘分析,無需依賴NGS數(shù)據(jù)的校正。
在6.8mm * 6.8mm的捕獲區(qū)域內有約220萬個直徑2.5μm的微孔,將布滿oligo(R1+Spatial Barcode+UMI+poly(dT)VN)直徑2.5μm的微球隨機嵌入到微孔之中,形成陣列,相鄰兩個微珠的中心距離為4.8μm。Spatial barcode 種類有為5600萬種,提供了更為長的sptail barcode長度,約為70bp,這能更好的兼容三代測序,能大幅提高nanopore數(shù)據(jù)的BC識別效率。
百創(chuàng)S1000分辨率最高可達到4.8μm,相比目前主流空間轉錄組測序芯片精度提高了近400倍,高分辨率下HE染色組織形態(tài)學與spots聚類空間分布圖重合度更高,可以更加精準識別空間基因表達的異質性和組織區(qū)域的特異性。
百創(chuàng)S1000芯片spot直徑為2.5μm, 可針對組織亞群在多級分辨率下再聚類分群,高分辨率下組織區(qū)域聚類結果增多。
可變剪切分析
融合基因分析
經(jīng)過不斷地研發(fā)測試,百創(chuàng)S1000以完成多項樣本測試,實測數(shù)據(jù)也表明百創(chuàng)S1000在廣泛樣本上都擁有較好的表現(xiàn)。
產(chǎn)品主要由三套試劑盒組成: